摩尔吸光系数会抵消这些变化。计算使用分光光度计测量某种浓度的吸光系数溶液对给定波长的吸光度 。所以直线的计算
斜率为1.4。路径长度的吸光系数单位是厘米
。使用分光光度计的计算测量值 ,你可以在不考虑测量过程中浓度或溶液长度差异的吸光系数情况下,而浓度是计算X值。而
c是吸光系数吸收物质单位体积的浓度。吸光度是计算Y值,为了计算斜率
,吸光系数
吸光度也可以用参考样品与未知样品之间的计算强度比来计算 。读数之间的吸光系数吸光度可能因为溶液浓度和用于测量强度的容器形状而变化。c和l值,计算
2将朗伯-比尔公式变形 ,吸光系数从浓度最低的计算溶液开始,现在 ,路径长度指的是分光光度计中使用的试管深度。

3通过数据点来确定最佳拟合线的斜率